Scuola di Microscopia 4° edizione 14-17 maggio 2019
Istituto Scientifico Romagnolo per lo Studio e la Cura dei Tumori

SCUOLA DI MICROSCOPIA

DEEP IMAGING

 

14 - 17 Maggio 2019


Istituto Scientifico Romagnolo per lo Studio e la Cura dei Tumori

Meldola (FC)

Programma 4° Edizione 2019 - Scuola di Microscopia

Locandina Scuola di Microscopia 4° Edizione 2019Scuola di Microscopia 4° Edizione 2019La 4° edizione della Scuola di Microscopia sarà incentrata sulle differenti strategie microscopiche per la realizzazione di Deep Imaging. Dopo che importanti passi in avanti in microscopia hanno riguardato la possibilità di osservare i campioni in vivo per studiare la dinamica delle molecole e delle strutture cellulari (argomento trattato nella 1° e 2° edizione della Scuola di Microscopia - Live Imaging), siamo andati ad incentrare la nostra attenzione sull'incremento del potere di risoluzione dei sistemi microscopici per vedere molecole o strutture cellulari sempre più piccole (3° edizione - Super Resolution). In questa edizione invece tratteremo del Deep Imaging, cioè della possibilità di analizzare campioni con elevate informazioni 3D mediante differenti sistemi ottici come la microscopia a foglietto di luce, in super risoluzione, confocale e associata alla microfluidica, in combinazione con metodi avanzati di analisi dell'immagine. Pertanto vedremo come questi diversi metodi possono massimizzare la penetrazione della luce attraverso campioni altamente dispersivi come sferoidi, organoidi e tessuti che sempre più rappresentano una nuova frontiera nella ricerca biomedica ed in particolare nello studio dei tumori.

La Scuola di Microscopia si rivolge ai ricercatori, studenti e tecnici che sono interessati ad acquisire gli elementi di base necessari per realizzare Deep Imaging su modelli cellulari 3D. Sono previste lezioni teoriche e laboratori pratici su 5 differenti tipi di strumentazioni, al fine di apprendere le principali metodiche e le procedure necessarie per acquisire immagini informative e di qualità.

PROGRAMMA DEL CORSO

Martedì 14 maggio 2019

16.00 Apertura segreteria e registrazione dei partecipanti
17.00  Apertura dei lavori Saluto degli organizzatori
17.45 Presentazione dei migliori lavori della Summer School 2018 "Vedere per credere" della Fondazione Golinelli
18.00 Microscopia multi messaggera Alberto Diaspro
19.30 Conclusione della giornata

Mercoledì 15 maggio 2019

09.00 Apertura segreteria e registrazione dei partecipanti
09.30 La chiarificazione dei campioni Cesare Covino
10.30 Pausa Caffè
11.00 Microscopia light sheet Monika Loeschiner (Luxendo)
12.00 Illuminazione strutturata, spinning disk e STED Alessandro Rossi (Crisel Instruments)
13.00 Pranzo
14.30 Organoidi e culture cellulari in 3D Simone Pasqua (Cell Dynamics)
15.15 Obiettivi per Deep Imaging Giacomo Cozzi (Nikon)
16.00 Sessione pratica 1: (Aule Gustafsson – Minsky – Zsigmondy – DeisserothPascal)
18.30 Conclusione giornata

Giovedì 16 maggio 2019

09.00 Image scanning microscopy Giuseppe Vicidomini
10.00 Pausa Caffè
10.30 Sessione pratica 2: (Aule GustafssonMinskyZsigmondy – DeisserothPascal)
13.00 Pranzo
14.30 UltraMicroscope II light sheet microscope Christian Feuillet (Miltenyi Biotec)
15.00 Volumetric imaging in lightsheet and 2PE Marco Dal Maschio
16.00 Sessione pratica 3: (Aule GustafssonMinskyZsigmondy – DeisserothPascal)
18.30 Conclusione giornata
19.00 Aperitivo Sociale

Venerdì 17 maggio 2019

09.00 Microscopia Correlativa in brain tissue Marco Canossa
09.30 Strategie per Deep Imaging a confronto Spartaco Santi
10.00 Pausa Caffè
10.30 Sessione pratica 4: (Aule GustafssonMinskyZsigmondy – DeisserothPascal)
13.00 Pranzo
14.30 Sessione pratica 5: (Aule GustafssonMinskyZsigmondy – DeisserothPascal)
17.00 Sessione pratica 6: libera
18.30 Fine lavori

LABORATORI PRATICI:

Aula Mats Gustafsson

Vedremo un sistema di super risoluzione che utilizza la teconologia a luce strutturata accoppiata ad uno spinning disk, mettendo in evidenza il mantenimento delle capacità di risoluzione e di penetrazione della luce su campioni spessi
Strumentazione: Sistema integrato da Crisel Instruments, con X-Light V2 + VCS (CrestOptics), software MetaMorph
Tutors: Alessandro Rossi, Maria Giubettini, Chiara Cordiglieri

Aula Richard Adolph Zsigmondy

Avremo a disposizione il microscopio Light-Sheet che permette di acquisire immagini di interi volumi a risoluzione cellulare, in questa tecnica una sezione del campione è illuminata da un piano di luce e i fotoni emessi vengono raccolti simultaneamente in direzione perpendicolare.e il multifotone che aumenta la profondità di penetrazione e diminuisce lo scattering rispetto alla luce visibile
Strumentazione: Light-Sheet Microscope QuVi SPIM (Luxendo)
Tutors: Monika Loeschiner, Björn Eismann, Marco Dal Maschio

Aula Marvin Minsky

Si studieranno i limiti del sezionamento in z del microscopio confocale e l'effetto della chiarificazione dei campioni sulla penetrazione della luce; nella seconda parte andremo ad applicare processi di analisi di immagine su dati volumetrici in 3D
Strumentazione: Confocal Microscope A1R (Nikon) / Software di analisi di immagine NIS (Nikon)
Tutors: Giacomo Cozzi, Pietro Cirigliano

Aula Blaise Pascal

Vedremo le potenzialità della microfluidica applicate allo studio in vivo degli sferoidi/organoidi, tale tecnologia, sviluppata da una brillante start up bolognese, permette di mantenere le cellule in sospensione in un ambiente fisiologico e allo stesso tempo di fare imaging ottico
Strumentazione: CELL Viewer (Cell Dynamics)
Tutors: Simone Pasqua, Giovanni Giozzet, Michele Zanoni

Aula Karl Deisseroth

Avremo a disposizione un sistema confocale in grado di produrre macro-imaging 3D; l'ottica può montare obiettivi al silicone con un indice di rifrazione adatto per campioni chiarificati in cui viene rimossa la componente lipidica, intrinsecamente opaca
Strumentazione: Confocal Laser Scanning Microscope / X-Clarity Tissue Clearing System (Logos Biosystems)
Tutors: Cesare Covino, Carola Cavallo

CON IL PATROCINIO DI

Fondazione Golinelli

IN COLLABORAZIONE CON

Crisel Intruments
TwinHelix
Cell Dynamics
Nikon
MACS Miltenyi Biotec